支原体检测试剂盒

 

 

产品简介:   

 

 支原体(mycoplasma):又称霉形体,为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体的侵染会引起细胞功能和基因表达的严重改变,并造成持续危害。由于支原体污染会严重影响实验结果的可靠性、重复性和一致性,对支原体的常规检测非常重要。
     

ZHENDUIXIBAO、PEIYANGJIYIJIDONGWUXUEQINGDEZHIYUANTIJIANCE,WOMENTUICHULEMyco-PCR-TEST KUAISUZHIYUANTIJIANCESHIJIHE。BENSHIJIHEJIYUPCRJIANCEYUANLI,GENJUZHIYUANTIGAODUBAOSHOUDE16HE23SrRNAQUYUSHEJIDETEYIXINGYINWU,JINGGUOJIANDANKUAISUDEPCR,CONGERXUNSUZHUNQUEPANDUANZHIYUANTIWURANSHIFOUBEIQINGCHU。

 

 汉恒生物(almabcn.com)推出的SaveItTM 抗支原体试剂能够在不影响细胞状态的前提下能够有效的清除支原体污染,从而使一些珍贵的细胞受到支原体污染之后能够得到挽救。

 

使用说明:

 

SHIYONGTrizol FACHOUTIDAIJIANCEXIBAODERNA,FANZHUANLUWEICDNA HOU,JIARUZHIYUANTIJIANCEYINWU,JINXINGPCR JIANCEXIBAOZHIYUANTIWURANQINGKUANG。

 

操作步骤:

 

1、样品处理

 

⑴ A:培养贴壁细胞:不须消化,可直接用Trizol进行消化、裂解,Trizol体积按1ml/10cm2比例加入。

     B:悬浮细胞可直接收集、裂解,每1ml Trizol可裂解5×106动物、植物或酵母细胞,或107细菌细胞。

⑵ XIBAOJIATrizolHOU,SHIWENFANGZHI5min,SHIQICHONGFENLIEJIE。ZHU:CISHIKEFANGRU-70℃ZHANGQIBAOCHI。

⑶ 12,000rpm LIXIN5min,QICHENDIAN。

⑷ AN200ulLVFANG/ml TrizolJIARULVFANG,ZHENDANGHUNYUNHOUSHIWENFANGZHI15min。

ZHU: JINYONGXUANWOZHENDANGQI,YIMIANJIYINZUDNADUANLIE。

⑸ 4℃ 12,000gLIXIN15min。

⑹ XIQUSHANGCENGSHUIXIANG,ZHILINGYILIXINGUANZHONG。ZHU:QIANWANBUYAOXIQUZHONGJIANJIEMIAN;RUOTONGSHITIQUDNAHEDANBAIZHI,ZEBAOLIUXIACENGFENXIANGCUNYU4℃BINGXIANG,RUOZHITIRNA,ZEQIXIACENGFENXIANG。

⑺ AN0.5mlYIBINGCHUN/ml Trizol JIARUYIBINGCHUNHUNYUN,SHIWENFANGZHI5-10min。

⑻ 4℃ 12,000gLIXIN10min,QISHANGQING,RNACHENYUGUANDI。

⑼ AN1ml 75%YICHUN/ml TrizolJIARU75%YICHUN,WENHEZHENDANGLIXINGUAN,XUANFUCHENDIAN。

⑽ 4℃ 8,000gLIXIN5min,JINLIANGQISHANGQING。

⑾ SHIWENLIANGGANHUOZHENKONGGANZAO5-10min。 ZHU:RNAYANGPINBUYAOGUOYUGANZAO,FOUCEHENNANRONGJIE。

⑿ 可用50ul H2O,TE buffer或0.5%SDS溶解RNA样品,55-60℃,5-10min。注:H2O、TE或0.5%SDS均须用DEPC处理并高压。

⒀ CEO.DZHIDINGLIANGRNANONGDU。ZHU:CIFANGFATIQURNA A260/A280ZHIZAI1.6-1.8ZHIJIAN;

 

注:产率估计:培养细胞(ug RNA/106 Cell):5-15ug。细胞量过少,可酌 情减少Trizol用量;细胞用量过多,会引起DNA对RNA的污染;

 

 

2、反转录

 

QINGCANZHAOXIANGGUANSHIJIHESHUOMINGSHU,RUTaKaRaFANZHUANLUSHIJIHEYIJIGIBICOLFANZHUANLUSHIJIHEDENG。(JIANFULU)

 

 

3、样品检测

 

YURESHUIYUGUOZHI96℃,JIANGZHUANGYOUYANGPINDE1.5mLLIXINGUANSHUIYU15min;ZAICHAOJINGTAIZHONGJINXINGYINWUDEHUNHEXISHI,PEIZHIPCRTIXI。

 

 

 

 

4、结果分析

 

FENBIELIYONGBIAO2DEFANYINGTIXI,BIAO3DEPCRFANYINGTIAOJIANJINXINGKUOZENGJIANCE,PAOJIAOJIEGUORUXIA(MUDEPIANDUANDEDAXIAO:502-520bp)。

 

 

 

 

ZHU:RUGUOZAI502-520bpZHIJIANYOUTIAODAIWEIYANGXING,MEIYOUTIAODAIWEIYINXING;YANGXING:ZHIYUANTIGANRAN;YINXING:  WEIGANRAN;GENJUPAOJIAOJIEGUO,YANGPIN1、2、3WUZHIYUANTIWURANTIAODAI,YANGPINWEIBEIZHIYUANTIWURAN。

 

 

5、使用频率

 

 

 

 

6、注意事项

 

       ⑴ 请按照实验室规定,做好必要的防护措施,穿戴整齐。
     ⑵ 操作过程中,注意避免交谈,以及佩戴好口罩;RNA提取以及反转录过程中,注意避免RNA污染以及降解等。
     ⑶ 样品建议进行3次独立重复实验,以确认实验结果。
     ⑷ 实验时,试剂盒组分中的试剂使用前应充分融化并混匀(混匀时禁止激烈振荡,只需要进行上下倒置多次进行混匀)。
     ⑸ 细胞培养物中含有青霉素和链霉素等抗生物素不会影响本品的检测结果。

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